[Artículo colaborativo] | Empleo de una estrategia de proteómica química para revelar la red de proteínas objetivo del cisplatino y mejorar la comprensión de su mecanismo anticancerígeno
Con los rápidos avances de la medicina moderna, se han logrado avances importantes en la investigación y el desarrollo de fármacos contra el cáncer. Entre ellos, el cisplatino destaca por su potente eficacia antitumoral en el tratamiento de diversos tumores sólidos, sirviendo como un rayo de esperanza para numerosos pacientes con cáncer. A pesar de su uso clínico generalizado, la comprensión de los mecanismos internos de la acción del cisplatino sigue siendo un tema central que la comunidad científica busca activamente. En este contexto, un equipo de investigación de la Facultad de Farmacia de Tongji de la Universidad de Ciencia y Tecnología de Huazhong ha publicado un artículo titulado "Objetivos moleculares del cisplatino en células HeLa exploradas a través de una estrategia competitiva de elaboración de perfiles de proteínas basada en actividades" en el Journal of Inorganic Biochemistry ( Factor de Impacto 3.9). Aprovechando la tecnología de análisis proteómico químico competitivo basada en sondas específicas de cisteína (ABPP competitivo), el estudio identifica con precisión los objetivos de cisplatino y sus sitios de acción en las células HeLa.
Con los rápidos avances de la medicina moderna, se han logrado avances importantes en la investigación y el desarrollo de fármacos contra el cáncer. Entre ellos, el cisplatino destaca por su potente eficacia antitumoral en el tratamiento de diversos tumores sólidos, sirviendo como un rayo de esperanza para numerosos pacientes con cáncer. A pesar de su uso clínico generalizado, la comprensión de los mecanismos internos de la acción del cisplatino sigue siendo un tema central que la comunidad científica busca activamente. En este contexto, un equipo de investigación de la Facultad de Farmacia de Tongji de la Universidad de Ciencia y Tecnología de Huazhong ha publicado un artículo titulado "Objetivos moleculares del cisplatino en células HeLa exploradas a través de una estrategia competitiva de elaboración de perfiles de proteínas basada en actividades" en el Journal of Inorganic Biochemistry ( Factor de Impacto 3.9). Aprovechando la tecnología de análisis proteómico químico competitivo basada en sondas específicas de cisteína (ABPP competitivo), el estudio identifica con precisión los objetivos de cisplatino y sus sitios de acción en las células HeLa.
Se utilizó un método competitivo de perfilado de cisteína para identificar la cisteína que se une al cisplatino en los proteomas de las células HeLa utilizando la sonda de destiobiotina yodoacetamida.
En este artículo, Chomix brindó apoyo experto en la preparación de muestras de proteómica química y la identificación y análisis de espectrometría de masas durante el proceso de descubrimiento de objetivos. Aprovechando el equipo de espectrometría de masas de alta resolución y la tecnología de proteómica química, las muestras de células HeLa tratadas con cisplatino se sometieron a una serie de análisis que incluyeron etiquetado con sonda reactiva a cisteína (DBI), separación por precipitación de proteínas, digestión con tripsina, etiquetado con isótopos, enriquecimiento de péptidos marcados con sonda, y LC-MS/MS. Este enfoque integral identificó con éxito 3571 péptidos, correspondientes a 1871 proteínas, con 46 proteínas identificadas como objetivos potenciales del cisplatino. Estas proteínas diana están predominantemente asociadas con el metabolismo del folato, la desubiquitinación de proteínas, la síntesis de tetrahidrobiopterina, el metabolismo del tetrahidrofolato y otras vías. El servicio profesional de identificación de objetivos de Chomix garantiza la confiabilidad y precisión de los datos, mejorando significativamente la credibilidad y el valor científico de los resultados de la investigación.
Figura 2: Análisis funcional de las proteínas diana del cisplatino
Además de la preparación de muestras de proteómica química y la identificación por espectrometría de masas, los servicios de identificación de objetivos proporcionados por Chomix también incluyen la identificación de sitios de unión de fármacos a proteínas, lo cual es crucial para revelar el mecanismo de acción de los fármacos. Para validar aún más el efecto de unión entre el cisplatino y sus objetivos proteicos recién descubiertos, se eligió el CAPN 1 de alta confianza para la validación. La proteína se incubó con cisplatino en una proporción molar de 1:10 y se observó un nuevo pico de producto además del pico de masa original de la proteína, coincidiendo la diferencia de masa con la de 10 moléculas de cisplatino. Este resultado demuestra claramente la interacción entre CAPN 1 y cisplatino. Estudios anteriores han demostrado que la apoptosis inducida por cisplatino en células HeLa se inhibe, lo que indica una correlación positiva entre la proteína y la actividad antitumoral del cisplatino. Este estudio proporciona nuevos conocimientos para explorar más a fondo el mecanismo de acción y la toxicidad del cisplatino.
Figura 3: Antes y después de la reacción entre la proteína CAPN 1 y el cisplatino.
En resumen, este artículo aclara con éxito los objetivos del cisplatino en las células HeLa utilizando el método ABPP competitivo, identificando el nuevo objetivo CAPN 1. Este descubrimiento proporciona información crucial sobre los mecanismos subyacentes a la acción y la toxicidad del cisplatino. Este estudio no sólo enriquece nuestra comprensión del mecanismo de acción del cisplatino, sino que también proporciona una potente herramienta para futuras investigaciones en este campo.
Nota especial: este artículo participó en el "Programa de premios de publicación en papel de ChomiX" y Chomix le otorgó un generoso premio. Extendemos una cálida invitación a más investigadores a unirse al "Programa de premios de publicaciones en papel ChomiX". Al reconocer los productos o servicios de ChomiX (por ejemplo, "Agradecemos a ChomiX Biotech Co., Ltd. (Nanjing, China) por su invaluable contribución a nuestros experimentos de proteómica química"), los investigadores pueden potencialmente participar en este programa de incentivos, fomentando la innovación y facilitando el intercambio de resultados de investigaciones. Chomix mantiene su compromiso de ser un socio firme en la comunidad de investigación científica, promoviendo activamente el progreso científico global y colaborando en investigaciones de vanguardia sobre los mecanismos de acción de los fármacos. Anticipamos ansiosamente colaborar con más equipos de investigación científica para marcar el comienzo de una nueva era de descubrimientos científicos.
Referencia:https://doi.org/10.1016/j.jinorgbio.2024.112518.