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Productos
ChomiX®-Magbeads Perlas magnéticas recubiertas de estreptavidina resistente a proteasas (prSA)
Gato.No.:CMXR-000002
nombre del producto:ChomiX®-Magbeads Cuentas magnéticas recubiertas de estreptavidina resistente a proteasas (prSA)
Introducción del producto
Las perlas magnéticas recubiertas de estreptavidina resistente a proteasas (prSA) ChomiX®-Magbeads están diseñadas con estreptavidina químicamente modificada, donde los residuos de lisina y arginina están químicamente sellados.Esta modificación no afecta la unión de las perlas a proteínas biotiniladas y al mismo tiempo previene la degradación enzimática por las proteasas tripsina y LysC.En los estudios proteómicos basados en espectrometría de masas, las proteasas tripsina y LysC se utilizan con frecuencia para la digestión de proteínas.Para evitar la pérdida de muestras, los investigadores realizan directamente la digestión enzimática en perlas en sistemas de perlas magnéticas de estreptavidina cargados con proteínas biotiniladas.
Sin embargo, este proceso de digestión enzimática también genera una gran cantidad de péptidos derivados de estreptavidina, que interfieren seriamente con la detección de péptidos de baja abundancia en análisis posteriores de espectrometría de masas.
Por lo tanto, el desarrollo de perlas magnéticas recubiertas de estreptavidina (prSA) resistente a proteasas ChomiX®-Magbeads puede reducir en gran medida esta interferencia, que es muy adecuada para la digestión enzimática directa de proteínas biotiniladas cargadas en perlas magnéticas y puede usarse ampliamente en proteómica química y Experimentos de interacción proteína-proteína en células como APEX y BioID.
Las perlas tienen una concentración de 10 mg/ml y un tamaño de partícula de 1,0 µm, con una alta capacidad de carga de estreptavidina (aproximadamente 50 µg/1 mg) y una hidrofilicidad extremadamente alta.Sus propiedades superparamagnéticas garantizan una rápida respuesta magnética.También poseen una excelente estabilidad de redispersión y estabilidad magnética, lo que garantiza eficazmente una alta tasa de unión a proteínas, baja adsorción no específica, uniformidad de reacción y consistencia de detección.
Caso de literatura
Las perlas magnéticas se utilizan para enriquecer y extraer proteínas biotiniladas del proteoma, seguido de digestión directa en las perlas e identificación mediante espectrometría de masas de alta resolución.En comparación con las perlas de estreptavidina convencionales (wtS), las muestras de perlas de estreptavidina resistentes a proteasas (prS) muestran una cantidad apenas detectable de péptidos derivados de estreptavidina en las muestras (Figura 1).
Cuando se aplica en experimentos de BioID para identificar proteínas que interactúan con SEC61B en células HeLa, prS puede identificar 362 proteínas, con una intensidad de señal proteica general aproximadamente 10 veces mayor que wtS (Figura 2).Los datos provienen de la literatura (Molecular Systems Biology, 2020).
Figura 1: Cromatogramas de picos de base de los péptidos en muestras después del enriquecimiento de wtS (izquierda) o prS (derecha).
Las intensidades correspondientes de los tres péptidos representativos (m/z = 603,3.655,3.1018,0) generados a partir de estreptavidina digerida en perlas se muestran en el panel inferior (XIC).
Figura 2: Número e intensidad de proteínas que interactúan con SEC61B identificadas por estreptavidina wtS y prS convencionales.
Nota
1. Antes del primer uso, agite completamente y mezcle bien para evitar cambios en la concentración de las perlas magnéticas.Evite ultrasonidos prolongados para evitar daños a la superficie de las perlas magnéticas.
2. La solución de almacenamiento de perlas contiene bajas concentraciones de antimicrobianos de molécula pequeña. Antes de su uso, realice la separación magnética y lave 2 o 3 veces con agua pura o solución tampón.Utilice las cuentas lo antes posible para evitar un almacenamiento prolongado.
3. Almacene a 4 ℃ y evite congelar y descongelar durante el uso.
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