La plataforma tecnológica TurboID implica fusionar una biotina ligasa mutada con el extremo C de una proteína objetivo. En las células sobreexpresadas, la adición de biotina biotinila rápidamente las proteínas que interactúan en 10 minutos, incluso a temperatura ambiente, con un ruido de fondo mínimo. Esta versatilidad hace que TurboID sea adecuado para una amplia gama de sistemas biológicos, incluidas células de mamíferos, plantas e insectos. Luego, las proteínas marcadas con biotina se aíslan, se enriquecen y se digieren para producir muestras de péptidos para espectrometría de masas, lo que permite un análisis detallado de las interacciones y funciones de las proteínas.
01.Alta eficiencia catalítica
02.No daña las células vivas.
03.Alta eficiencia y estabilidad de biotinilación.
04.Biotinilación efectiva a temperatura ambiente (25°C)
Proyecto | Identificación de redes de interacción proteína-proteína en células |
Muestra | Lisado celular, células vivas. |
Plataforma de hardware | Pulverizador de células ultrasónico sin contacto, sistema de imágenes ChemiDoc MP, espectrómetro de masas Orbitrap Fusion Lumos Tribrid/Orbitrap Exploris 480/Q Exactive HF-X/timsTOF Pro 2 |
Duración del proyecto | 4-6 semanas |
Entregables | Informe del proyecto (incluidos procedimientos experimentales, cuadros de análisis de datos, resultados de análisis bioinformáticos) |
Precio | Haga clic para consultar |
Objetivo del proyecto:Analizar los cambios en el interactoma proteico de la proteína diana (POI) en las células antes y después del tratamiento farmacológico.
Solución:Utilice una estrategia de etiquetado de proximidad mediante la construcción de un vector de expresión POI-TurboID, sobreexpresándolo en células y estableciendo grupos de control y tratados con fármacos para la biotinilación. Enriquezca el interactoma de proteínas en las células, seguido de un análisis cualitativo y cuantitativo de las diferencias en proteínas biotiniladas para caracterizar los cambios en el interactoma de POI.
Visualización de datos: