Billes magnétiques enrobées de streptavidine résistante à la protéase (prSA) ChomiX-Magbeads

Billes magnétiques enrobées de streptavidine résistante à la protéase (prSA) ChomiX®-Magbeads

Chat.Non.：CMXR-000002

Nom du produit：Billes magnétiques enrobées de streptavidine résistante à la protéase (prSA) ChomiX®-Magbeads

Présentation du produit

Les billes magnétiques enrobées de streptavidine résistante à la protéase (prSA) ChomiX®-Magbeads sont conçues avec de la streptavidine chimiquement modifiée, où les résidus de lysine et d'arginine sont chimiquement scellés.Cette modification n’affecte pas la liaison des billes aux protéines biotinylées tout en empêchant la dégradation enzymatique par les protéases Trypsine et LysC.Dans les études protéomiques basées sur la spectrométrie de masse, les protéases Trypsine et LysC sont fréquemment utilisées pour la digestion des protéines.Pour éviter la perte d’échantillons, les chercheurs effectuent directement une digestion enzymatique sur billes dans des systèmes de billes magnétiques de streptavidine chargés de protéines biotinylées.

Cependant, ce processus de digestion enzymatique génère également une grande quantité de peptides dérivés de la streptavidine, qui interfèrent sérieusement avec la détection de peptides en faible abondance lors des analyses ultérieures par spectrométrie de masse.

Par conséquent, le développement de billes magnétiques enrobées de streptavidine résistante à la protéase (prSA) ChomiX®-Magbeads peut réduire considérablement cette interférence, ce qui est très approprié pour la digestion enzymatique directe des protéines biotinylées chargées sur des billes magnétiques, et peut être largement utilisé en protéomique chimique et expériences d'interaction protéine-protéine dans des cellules telles que APEX et BioID.

Les billes ont une concentration de 10 mg/ml et une taille de particule de 1,0 µm, avec une capacité de charge élevée en streptavidine (environ 50 µg/1 mg) et une hydrophilie extrêmement élevée.Leurs propriétés superparamagnétiques garantissent une réponse magnétique rapide.Ils possèdent également une excellente stabilité de redispersion et une stabilité magnétique, garantissant efficacement un taux de liaison élevé aux protéines, une faible adsorption non spécifique, une uniformité de réaction et une cohérence de détection.

Cas de littérature

Les billes magnétiques sont utilisées pour enrichir et extraire les protéines biotinylées du protéome, suivies d'une digestion directe sur bille et d'une identification par spectrométrie de masse à haute résolution.Comparés aux billes de streptavidine conventionnelles (wtS), les échantillons de billes de streptavidine résistantes à la protéase (prS) présentent une quantité à peine détectable de peptides dérivés de la streptavidine dans les échantillons (Figure 1).

Lorsqu'il est appliqué dans des expériences BioID pour identifier les protéines interagissant avec SEC61B dans les cellules HeLa, le prS peut identifier 362 protéines, avec une intensité globale du signal protéique environ 10 fois supérieure à celle du wtS (Figure 2).Les données proviennent de la littérature (Molecular Systems Biology, 2020).

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Figure 1 : Chromatogrammes des pics de base des peptides dans les échantillons après enrichissement en wtS (à gauche) ou prS (à droite).

Les intensités correspondantes des trois peptides représentatifs (m/z = 603,3 655,3 1018,0) générés à partir de streptavidine digérée sur billes sont indiquées dans le panneau inférieur (XIC).

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Figure 2 : Nombre et intensité des protéines interagissant avec SEC61B identifiées par la streptavidine conventionnelle wtS et prS.

Note

1. Avant la première utilisation, vortexer complètement et bien mélanger pour éviter de modifier la concentration des billes magnétiques.Évitez les ultrasons prolongés pour éviter d’endommager la surface des billes magnétiques.

2. La solution de stockage des billes contient de faibles concentrations de petites molécules antimicrobiennes. Avant utilisation, effectuez une séparation magnétique et un lavage 2 à 3 fois avec de l'eau pure ou une solution tampon.Utilisez les perles dès que possible pour éviter un stockage prolongé.

3. Conserver à 4 ℃ et éviter le gel-dégel pendant l'utilisation.