[Innovazione con punteggio elevato] Miglioramento della regolazione antinfiammatoria di SLC15A4 con il nuovo inibitore AJ 2-30: un approccio di proteomica chimica (IF 14.8)
Questo articolo utilizza la proteomica chimica per ideare e vagliare una gamma di nuovi inibitori mirati a SLC15A4, una proteina transmembrana infiammatoria cruciale altamente espressa nelle cellule presentanti l'antigene. Il targeting iniziale di potenziali inibitori ha utilizzato la strategia della libreria di sonde con frammenti completamente funzionalizzati (FFF), identificando FFF-21 come un potente inibitore della produzione di IFN-α tra numerose sonde. La successiva ottimizzazione strutturale ha portato allo sviluppo del composto AJ 2-30, che non solo ha dimostrato un'inibizione eccezionale, ma ha anche confermato SLC15A4 come obiettivo primario della modifica post-fotoreticolazione. Ulteriori indagini hanno rivelato che AJ 2-30 esercitava potenti effetti antinfiammatori riducendo la stabilità di SLC15A4, inducendone la degradazione attraverso la via lisosomiale e inibendo efficacemente l'attivazione di TLR 7-9 e NOD. Questo studio non solo introduce con successo gli inibitori SLC15A4 con significativa attività antinfiammatoria, ma apre anche la strada allo sviluppo di nuovi farmaci antinfiammatori.
Itinerario di ricerca
Processo sperimentale
1. Strategia della libreria di sonde con frammenti completamente funzionalizzati (FFF) per lo screening degli inibitori SLC15A4.
Gli autori hanno iniziato il loro studio esaminando gli inibitori SLC15A4 utilizzando una libreria di sonde di frammenti completamente funzionalizzati (FFF). Questo FFF comprende due componenti: un gruppo di riconoscimento molecolare contenente frammenti di compressa progettati per colpire SLC15A4 e un altro gruppo arricchito fotoreticolato con doppi gruppi acrimidina e alchino per visualizzare SLC15A4. Utilizzando un flusso di lavoro di proteomica chimica, gli autori hanno confermato il legame di questa libreria di sonde FFF a SLC15A4 nelle cellule e hanno valutato se la sonda FFF potesse attenuare i livelli di IFN-α nelle cellule stimolate con TLR 9. I risultati hanno dimostrato che tra tutte le sonde FFF che si legano a SLC15A4, FFF-21 ha mostrato la più alta capacità di inibire i livelli di IFN-α, con il suo analogo privo di etichetta, FFF-21c, che ha mostrato effetti inibitori simili.
2. Modificazione del fotoreticolazione degli inibitori SLC15A4.
Dopo la selezione iniziale del composto FFF-21c, gli autori hanno proceduto all'ottimizzazione della sua struttura. Attraverso la sintesi di diversi analoghi di FFF-21c, hanno identificato AJ 2-30 come l'inibitore più potente. Utilizzando tecniche di fotoreticolazione, hanno confermato la sua interazione con il bersaglio. Successivamente, utilizzando sia il metodo di etichettatura diretta che il metodo di competizione indiretta dell'ABPP, insieme all'analisi dello spostamento termico cellulare (CETSA), gli autori hanno stabilito definitivamente SLC15A4 come bersaglio primario di AJ 2-30.
3. Il meccanismo antinfiammatorio rivela che AJ 2-30 interrompe la stabilità di SLC15A4.
Dopo la conferma del legame di AJ 2-30 con SLC15A4 e del suo effetto inibitorio, gli autori hanno condotto una serie di esperimenti biochimici per chiarire il meccanismo antinfiammatorio di AJ 2-30. I risultati hanno rivelato che AJ 2-30 induce la degradazione mediata dal lisosoma di SLC15A4 destabilizzando la proteina, inibendo così l'attivazione di TLR 7-9 e NOD nelle cellule immunitarie in modo dipendente da SLC15A4. Ciò sottolinea il potenziale di AJ 2-30 nel trattamento delle malattie infiammatorie e autoimmuni.
In sintesi, questo studio utilizza abilmente tecniche di proteomica chimica per identificare AJ 2-30, un potente inibitore di SLC15A4 con notevole attività antinfiammatoria. Questo composto dimostra un'efficacia significativa nei modelli animali prendendo di mira specificamente la stabilità di SLC15A4 e il suo ruolo nella presentazione dell'antigene e nelle vie di segnalazione infiammatoria. Questo progresso fondamentale non solo migliora la nostra comprensione degli obiettivi terapeutici antinfiammatori, ma pone anche solide basi per il futuro sviluppo di nuovi agenti terapeutici per una varietà di malattie infiammatorie e autoimmuni. Con ulteriori ricerche e validazioni cliniche, questi nuovi inibitori SLC15A4 sono pronti a offrire opzioni terapeutiche più precise ed efficaci per una moltitudine di pazienti, esercitando così un profondo impatto sulla salute globale.