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제품
ChomiX®-Magbeads 단백질분해효소 저항성 스트렙타비딘(prSA) 코팅 마그네틱 비드
고양이.아니요.：CMXR-000002
상품명：ChomiX®-Magbeads 프로테아제 저항성 스트렙타비딘(prSA) 코팅 마그네틱 비드
제품소개
ChomiX®-Magbeads 단백질 분해효소 저항성 스트렙타비딘(prSA) 코팅 마그네틱 비드는 라이신과 아르기닌 잔류물이 화학적으로 밀봉된 화학적으로 변형된 스트렙타비딘으로 설계되었습니다.이 변형은 트립신 및 LysC 프로테아제에 의한 효소 분해를 방지하면서 비오틴화된 단백질에 결합하는 비드에 영향을 미치지 않습니다.질량 분석 기반 단백질체학 연구에서 트립신과 LysC 프로테아제는 단백질 소화에 자주 사용됩니다.샘플 손실을 방지하기 위해 연구자들은 비오티닐화 단백질이 탑재된 스트렙타비딘 자기 비드 시스템에서 비드 위 효소 분해를 직접 수행합니다.
그러나 이 효소 소화 과정은 또한 다량의 스트렙타비딘 유래 펩티드를 생성하며, 이는 후속 질량 분석 분석에서 소량의 펩티드 검출을 심각하게 방해합니다.
따라서 ChomiX®-Magbeads Protease-Resistant Streptavidin (prSA) 코팅 마그네틱 비드의 개발은 이러한 간섭을 크게 줄일 수 있으며, 이는 마그네틱 비드에 로딩된 비오티닐화된 단백질의 직접적인 효소 소화에 매우 적합하며 화학 단백질체학 및 화학 단백질체학에 널리 사용될 수 있습니다. APEX, BioID와 같은 세포에서의 단백질-단백질 상호작용 실험.
비드는 10mg/ml의 농도와 1.0μm의 입자 크기를 가지며, 높은 스트렙타비딘 로딩 용량(약 50μg/1mg)과 매우 높은 친수성을 갖습니다.초상자성 특성은 빠른 자기 반응을 보장합니다.또한 우수한 재분산 안정성과 자기 안정성을 보유하여 높은 단백질 결합률, 낮은 비특이적 흡착, 반응 균일성 및 검출 일관성을 효과적으로 보장합니다.
문학 사례
자기 비드는 프로테옴에서 비오티닐화된 단백질을 풍부하게 하고 추출하는 데 사용되며, 이어서 비드 상에서 직접 분해되고 고해상도 질량 분석법을 통해 식별됩니다.기존의 스트렙타비딘 비드(wtS)와 비교하여, 프로테아제 저항성 스트렙타비딘 비드(prS) 샘플은 샘플에서 거의 검출할 수 없는 양의 스트렙타비딘 유래 펩타이드를 보여줍니다(그림 1).
HeLa 세포에서 SEC61B 상호 작용 단백질을 식별하기 위해 BioID 실험에 적용할 때 prS는 362개의 단백질을 식별할 수 있으며 전체 단백질 신호 강도는 wtS보다 약 10배 더 높습니다(그림 2).데이터의 출처는 문헌(Molecular Systems Biology, 2020)입니다.
그림 1: wtS(왼쪽) 또는 prS(오른쪽) 농축 후 샘플 내 펩타이드의 기본 피크 크로마토그램.
비드 상에서 소화된 스트렙타비딘으로부터 생성된 3개의 대표적인 펩타이드(m/z = 603.3,655.3,1018.0)의 해당 강도가 하단 패널(XIC)에 표시되어 있습니다.
그림 2: 기존 스트렙타비딘 wtS 및 prS로 식별된 SEC61B 상호 작용 단백질의 수와 강도.
메모
1. 처음 사용하기 전, 마그네틱 비드 농도가 변하지 않도록 완전히 휘저어 잘 섞어주세요.자기 비드 표면의 손상을 방지하려면 장시간 초음파를 사용하지 마십시오.
2. 비드보관용액에는 저농도의 저분자항균제가 함유되어 있으므로, 사용 전 자력선별을 실시하고 순수 또는 완충용액으로 2~3회 세척한다.장기간 보관을 피하기 위해 가능한 한 빨리 구슬을 사용하십시오.
3. 4℃에 보관하고, 사용 중에는 동결-해동을 피하십시오.
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