hoofd_banner1

Producten

ChomiX®-Magbeads Protease-resistente streptavidine (prSA) gecoate magnetische kralen

Kat.Nee.:CMXR-000002

productnaam:ChomiX®-Magbeads Protease-resistente streptavidine (prSA) gecoate magnetische kralen

product Introductie

ChomiX®-Magbeads Protease-resistente streptavidine (prSA) gecoate magnetische kralen zijn ontworpen met chemisch gemodificeerd streptavidine, waarbij lysine- en arginineresiduen chemisch zijn afgedicht.Deze modificatie heeft geen invloed op de binding van kralen aan gebiotinyleerde eiwitten, terwijl enzymatische afbraak door trypsine- en LysC-proteasen wordt voorkomen.In op massaspectrometrie gebaseerde proteomics-onderzoeken worden trypsine- en LysC-proteasen vaak gebruikt voor de vertering van eiwitten.Om monsterverlies te voorkomen, voeren onderzoekers rechtstreeks enzymatische vertering op de kraal uit in magnetische streptavidine-kraalsystemen geladen met gebiotinyleerde eiwitten.

Dit enzymatische verteringsproces genereert echter ook een grote hoeveelheid van streptavidine afgeleide peptiden, die de detectie van peptiden met een lage overvloed in daaropvolgende massaspectrometrie-analyse ernstig verstoren.

Daarom kan de ontwikkeling van ChomiX®-Magbeads Protease-resistente Streptavidin (prSA) gecoate magnetische kralen deze interferentie aanzienlijk verminderen, wat zeer geschikt is voor directe enzymatische vertering van gebiotinyleerde eiwitten die op magnetische kralen zijn geladen, en op grote schaal kan worden gebruikt in chemische proteomics en eiwit-eiwitinteractie-experimenten in cellen zoals APEX en BioID.

De korrels hebben een concentratie van 10 mg/ml en een deeltjesgrootte van 1,0 μm, met een hoog laadvermogen voor streptavidine (ongeveer 50 μg / 1 mg) en extreem hoge hydrofiliciteit.Hun superparamagnetische eigenschappen garanderen een snelle magnetische respons.Ze bezitten ook een uitstekende herdispersiestabiliteit en magnetische stabiliteit, waardoor ze effectief een hoge eiwitbindingssnelheid, lage niet-specifieke adsorptie, reactie-uniformiteit en detectieconsistentie garanderen.

Literatuurzaak

De magnetische kralen worden gebruikt om gebiotinyleerde eiwitten uit het proteoom te verrijken en te extraheren, gevolgd door directe vertering op de kraal en identificatie door middel van massaspectrometrie met hoge resolutie.Vergeleken met de conventionele streptavidinekralen (wtS) vertonen de protease-resistente streptavidinekralen (prS) monsters een nauwelijks detecteerbare hoeveelheid van streptavidine afgeleide peptiden in de monsters (Figuur 1).

Wanneer toegepast in BioID-experimenten om met SEC61B interacterende eiwitten in HeLa-cellen te identificeren, kan prS 362 eiwitten identificeren, met een algehele eiwitsignaalintensiteit die ongeveer 10 keer hoger is dan die van wtS (Figuur 2).De gegevens zijn afkomstig uit de literatuur (Molecular Systems Biology, 2020).

_cgi-bin_mmwebwx-bin_webwxgetmsgimg__&MsgID=5975855783773314984&skey=@crypt_f8f7338c_c7041bda8f36ff4ded0d27c585996b1f&mmweb_appid=wx_webfilehelper

Figuur 1: Basispiekchromatogrammen van de peptiden in monsters na verrijking van wtS (links) of prS (rechts).

De overeenkomstige intensiteiten van de drie representatieve peptiden (m/z = 603,3.655,3.1018,0) gegenereerd uit op de korrel gedigereerd streptavidine worden getoond in het onderste paneel (XIC).

_cgi-bin_mmwebwx-bin_webwxgetmsgimg__&MsgID=7303143611616562577&skey=@crypt_f8f7338c_c7041bda8f36ff4ded0d27c585996b1f&mmweb_appid=wx_webfilehelper

Figuur 2: Aantal en intensiteit van SEC61B-interagerende eiwitten geïdentificeerd door conventionele streptavidine wtS en prS.

Opmerking

1. Vóór het eerste gebruik volledig vortexen en goed mengen om te voorkomen dat de concentratie van de magnetische parels verandert.Vermijd langdurige echografie om schade aan het oppervlak van magnetische kralen te voorkomen.
 
2. De kraalopslagoplossing bevat lage concentraties antimicrobieel molecuul met kleine moleculen. Voer vóór gebruik een magnetische scheiding uit en was 2-3 keer met zuiver water of bufferoplossing.Gebruik de kralen zo snel mogelijk om langdurige opslag te voorkomen.
 
3. Bewaren bij 4℃ en voorkom bevriezing en dooi tijdens gebruik.

Geïnteresseerd in het ontvangen van gratis magnetische kralenmonsters?

Ontvang vandaag nog uw gratis monsters.


  • Vorig:
  • Volgende:

  • Schrijf hier uw bericht en stuur het naar ons