Odbierz darmowe próbki już dziś.
Kot.NIE.:CMXR-000002
Nazwa produktuKoraliki magnetyczne powlekane streptawidyną (prSA) ChomiX®-Magbeads
ChomiX®-Magbeads Koraliki magnetyczne powlekane streptawidyną (prSA) odporne na proteazy zostały zaprojektowane z użyciem chemicznie modyfikowanej streptawidyny, w której reszty lizyny i argininy są chemicznie zamknięte.Ta modyfikacja nie wpływa na wiązanie kulek z biotynylowanymi białkami, jednocześnie zapobiegając degradacji enzymatycznej przez proteazy trypsyny i LysC.W badaniach proteomicznych opartych na spektrometrii mas do trawienia białek często stosuje się proteazy trypsynowe i LysC.Aby uniknąć utraty próbki, badacze bezpośrednio przeprowadzają trawienie enzymatyczne na kulkach w systemach kulek magnetycznych streptawidyny zawierających biotynylowane białka.
Jednakże ten proces trawienia enzymatycznego generuje również dużą ilość peptydów pochodzących ze streptawidyny, które poważnie zakłócają wykrywanie peptydów o małej liczebności w późniejszej analizie spektrometrii mas.
Dlatego też opracowanie ChomiX®-Magbeads odpornych na proteazę kulek magnetycznych powlekanych streptawidyną (prSA) może znacznie zmniejszyć tę interferencję, co jest bardzo odpowiednie do bezpośredniego enzymatycznego trawienia biotynylowanych białek załadowanych na kulki magnetyczne i może być szeroko stosowane w proteomice chemicznej i eksperymenty interakcji białko-białko w komórkach takich jak APEX i BioID.
Perełki mają stężenie 10 mg/ml i wielkość cząstek 1,0 μm, wysoką zdolność obciążania streptawidyną (około 50 μg/1 mg) i wyjątkowo wysoką hydrofilowość.Ich właściwości superparamagnetyczne gwarantują szybką reakcję magnetyczną.Posiadają również doskonałą stabilność redyspersyjną i stabilność magnetyczną, skutecznie zapewniając wysoką szybkość wiązania białek, niską niespecyficzną adsorpcję, jednorodność reakcji i spójność detekcji.
Kulki magnetyczne służą do wzbogacania i ekstrakcji biotynylowanych białek z proteomu, a następnie bezpośredniego trawienia na kulce i identyfikacji za pomocą spektrometrii mas o wysokiej rozdzielczości.W porównaniu z konwencjonalnymi kulkami streptawidyny (wtS), próbki kulek streptawidyny odpornych na proteazy (prS) wykazują w próbkach ledwo wykrywalną ilość peptydów pochodzących ze streptawidyny (Rysunek 1).
Po zastosowaniu w eksperymentach BioID do identyfikacji białek oddziałujących z SEC61B w komórkach HeLa, prS może zidentyfikować 362 białka, przy ogólnej intensywności sygnału białkowego około 10 razy wyższej niż wtS (ryc. 2).Dane pochodzą z literatury (Molecular Systems Biology, 2020).
Figura 1: Chromatogramy piku podstawowego peptydów w próbkach po wzbogaceniu wtS (po lewej) lub prS (po prawej).
Odpowiednie intensywności trzech reprezentatywnych peptydów (m/z = 603,3655,3,1018,0) wytworzonych ze streptawidyny trawionej na kulkach pokazano na dolnym panelu (XIC).
Figura 2: Liczba i intensywność białek oddziałujących z SEC61B zidentyfikowanych za pomocą konwencjonalnej streptawidyny wtS i prS.
1. Przed pierwszym użyciem należy całkowicie wymieszać i wymieszać, aby zapobiec zmianie stężenia kulek magnetycznych.Unikaj długotrwałych ultradźwięków, aby zapobiec uszkodzeniu powierzchni kulek magnetycznych.
2. Roztwór do przechowywania kulek zawiera niskocząsteczkowe środki przeciwdrobnoustrojowe. Przed użyciem należy przeprowadzić separację magnetyczną i przemyć 2-3 razy czystą wodą lub roztworem buforowym.Zużyj kulki jak najszybciej, aby uniknąć długiego przechowywania.
3. Przechowywać w temperaturze 4°C i unikać zamarzania i rozmrażania podczas użytkowania.
Odbierz darmowe próbki już dziś.