[Artigo Colaborativo] | Empregando estratégia de proteômica química para revelar a rede de proteínas-alvo da cisplatina e melhorar a compreensão de seu mecanismo anticâncer
Com os rápidos avanços na medicina moderna, avanços significativos foram alcançados na pesquisa e desenvolvimento de medicamentos contra o câncer. Entre estes, a cisplatina destaca-se pela sua potente eficácia antitumoral no tratamento de vários tumores sólidos, servindo como um farol de esperança para numerosos pacientes com cancro. Apesar do seu uso clínico generalizado, a compreensão dos mecanismos internos de ação da cisplatina continua a ser um tema central ativamente perseguido pela comunidade científica. Neste contexto, uma equipe de pesquisa da Tongji College of Pharmacy, Huazhong University of Science and Technology, publicou um artigo intitulado "Molecular Targets of Cisplatina in HeLa Cells Explored Through Competitive Activity-Based Protein Profiling Strategy" no Journal of Inorganic Biochemistry ( Fator de Impacto 3.9). Aproveitando a tecnologia de análise proteômica química competitiva baseada em sondas específicas de cisteína (ABPP competitiva), o estudo identifica com precisão os alvos da cisplatina e seus locais de ação nas células HeLa.
Com os rápidos avanços na medicina moderna, avanços significativos foram alcançados na pesquisa e desenvolvimento de medicamentos contra o câncer. Entre estes, a cisplatina destaca-se pela sua potente eficácia antitumoral no tratamento de vários tumores sólidos, servindo como um farol de esperança para numerosos pacientes com cancro. Apesar do seu uso clínico generalizado, a compreensão dos mecanismos internos de ação da cisplatina continua a ser um tema central ativamente perseguido pela comunidade científica. Neste contexto, uma equipe de pesquisa da Tongji College of Pharmacy, Huazhong University of Science and Technology, publicou um artigo intitulado "Molecular Targets of Cisplatina in HeLa Cells Explored Through Competitive Activity-Based Protein Profiling Strategy" no Journal of Inorganic Biochemistry ( Fator de Impacto 3.9). Aproveitando a tecnologia de análise proteômica química competitiva baseada em sondas específicas de cisteína (ABPP competitiva), o estudo identifica com precisão os alvos da cisplatina e seus locais de ação nas células HeLa.
Um método competitivo de perfil de cisteína foi usado para identificar cisteína de ligação à cisplatina em proteomas de células HeLa usando a sonda destiobiotina iodoacetamida.
Neste artigo, a Chomix forneceu suporte especializado na preparação de amostras de proteômica química e identificação e análise por espectrometria de massa durante o processo de descoberta do alvo. Aproveitando equipamentos de espectrometria de massa de alta resolução e tecnologia de proteômica química, amostras de células HeLa tratadas com cisplatina foram submetidas a uma série de análises, incluindo marcação com sonda reativa à cisteína (DBI), separação por precipitação de proteínas, digestão com tripsina, marcação com isótopos, enriquecimento de peptídeos marcados com sonda, e LC-MS/MS. Esta abordagem abrangente identificou com sucesso 3.571 peptídeos, correspondendo a 1.871 proteínas, com 46 proteínas identificadas como alvos potenciais da cisplatina. Estas proteínas alvo estão predominantemente associadas ao metabolismo do folato, desubiquitinação de proteínas, síntese de tetrahidrobiopterina, metabolismo de tetrahidrofolato e outras vias. O serviço profissional de identificação de alvos da Chomix garante a confiabilidade e a precisão dos dados, aumentando significativamente a credibilidade e o valor científico dos resultados da pesquisa.
Figura 2: Análise Funcional de Proteínas Alvo da Cisplatina
Além da preparação de amostras proteômicas químicas e da identificação por espectrometria de massa, os serviços de identificação de alvos fornecidos pela Chomix também incluem a identificação de sítios de ligação droga-proteína, o que é crucial para revelar o mecanismo de ação dos medicamentos. Para validar ainda mais o efeito de ligação entre a cisplatina e seus alvos proteicos recém-descobertos, o CAPN 1 de alta confiança foi escolhido para validação. A proteína foi incubada com cisplatina numa proporção molar de 1:10, e foi observado um novo pico de produto além do pico de massa original da proteína, com a diferença de massa correspondente à de 10 moléculas de cisplatina. Este resultado demonstra claramente a interação entre CAPN 1 e cisplatina. Estudos anteriores mostraram que a apoptose induzida pela cisplatina em células HeLa é inibida, indicando uma correlação positiva entre a proteína e a atividade antitumoral da cisplatina. Este estudo fornece novos insights para explorar ainda mais o mecanismo de ação e toxicidade da cisplatina.
Figura 3: Antes e Depois da Reação entre a Proteína CAPN 1 e a Cisplatina.
Em resumo, este artigo elucida com sucesso os alvos da cisplatina em células HeLa usando o método Competitivo ABPP, identificando o novo alvo CAPN 1. Esta descoberta fornece insights cruciais sobre os mecanismos subjacentes à ação e toxicidade da cisplatina. Este estudo não apenas enriquece a nossa compreensão do mecanismo de ação da cisplatina, mas também fornece uma ferramenta potente para futuras pesquisas neste domínio.
Nota especial: Este artigo participou do "ChomiX Paper Publication Award Program" e recebeu um prêmio generoso da Chomix. Estendemos um caloroso convite a mais pesquisadores para se juntarem ao "Programa de Prêmio de Publicação em Papel ChomiX". Ao reconhecer os produtos ou serviços da ChomiX (por exemplo, "Agradecemos à ChomiX Biotech Co., Ltd. (Nanjing, China) por sua contribuição inestimável para nossos experimentos de proteômica química"), os pesquisadores podem potencialmente participar deste programa de incentivo, promovendo a inovação e facilitando o intercâmbio de resultados de pesquisas. A Chomix continua comprometida em ser um parceiro firme na comunidade de pesquisa científica, promovendo ativamente o progresso científico global e colaborando em pesquisas de ponta sobre mecanismos de ação de medicamentos. Esperamos ansiosamente colaborar com mais equipes de pesquisa científica para inaugurar uma nova era de descobertas científicas.
Referência:https://doi.org/10.1016/j.jinorgbio.2024.112518.