Análise ômica de modificações pós-traducionais de cisteína

A cisteína, com a sua notável reatividade, desempenha um papel fundamental na estrutura e função das proteínas. Servindo como reagente nucleofílico, centro catalítico redox, ligante de íons metálicos e local chave para mudanças conformacionais, ele participa extensivamente e influencia profundamente a atividade proteica e os mecanismos regulatórios. É importante notar que os resíduos de cisteína são propensos a sofrer vários tipos de modificações pós-traducionais (PTMs), que não apenas ajustam as propriedades funcionais das proteínas, mas também podem levar ao comprometimento funcional. Dada a estreita associação de tais modificações com inúmeras doenças humanas importantes, a análise qualitativa e quantitativa de PTMs de cisteína em proteínas é de suma importância. Isto tem um valor indispensável para uma compreensão aprofundada das funções biológicas de proteínas relevantes e dos seus mecanismos de acção nos estados de saúde e doença.

Chomix tem vasta experiência na identificação de modificações de cisteína, como a persulfidação de cisteína. Utilizando sondas universais de cisteína de forma inovadora com base na diferença de pKa entre -SH e -SSH, ajustamos o pH para reduzir a interferência de fundo de -SH, permitindo que as sondas rotulem predominantemente -SSH e, assim, identifiquem efetivamente os locais de sulfenilação.

Chomix possui tecnologia avançada de espectrometria de massa capaz de resolver direta e precisamente vários tipos de modificações pós-traducionais de proteínas e seus locais específicos. Através da integração inteligente de técnicas de separação e enriquecimento com rotulagem de isótopos e outros métodos avançados, possibilitamos análises qualitativas e quantitativas em larga escala e de alto rendimento de várias modificações, fornecendo suporte técnico robusto para pesquisas aprofundadas sobre modificações pós-traducionais de proteínas.

Nossas vantagens

1. Experiência Profissional: Com vasta experiência e publicações em periódicos importantes, oferecemos serviços personalizados para obter os melhores resultados.

2. Gestão de qualidade rigorosa: Nossos sistemas de qualidade maduros aderem aos padrões ISO9001, garantindo relatórios confiáveis.

3. Serviço abrangente: Do projeto da sonda à análise de bioinformática, fornecemos consultoria completa até a entrega, com atualizações oportunas do progresso.

4. Equipamento avançado: Equipados com espectrômetros de massa de última geração, como Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480 e Bruker timsTOF, apoiamos pesquisas inovadoras.

Nosso serviço

Projeto	Análise ômica de modificações pós-traducionais de cisteína
Amostra	Proteína pura, lisado celular, células vivas, tecido doente, sangue, bactérias, tecido vegetal
Plataforma de Hardware	Pulverizador de células ultrassônicas sem contato, sistema de imagem ChemiDoc MP, espectrômetro de massa Orbitrap Fusion Lumos Tribrid/Orbitrap Exploris 480/Q Exactive HF-X/timsTOF Pro 2
Duração do Projeto	4-8 semanas
Entregáveis	Relatório do Projeto (incluindo procedimentos experimentais, gráficos de análise de dados, resultados de análises de bioinformática)
Preço	Clique para consultar

Estudo de caso

Tiolação refere-se ao acoplamento de um grupo tiol (-SSH) a resíduos de cisteína em proteínas, mediado por sulfeto de hidrogênio (H2S). Para investigar ainda mais este processo, proteomas inteiros podem ser extraídos de amostras de células ou tecidos e rotulados usando um método de sonda química (sonda específica para cisteína). Ao contrário da interferência tiol, este método permite a marcação eficaz de grupos tiol ajustando com precisão o pH. Posteriormente, com o auxílio da espectrometria de massa de alta resolução, os pesquisadores podem identificar com precisão os locais de tiolação, elucidando ainda mais o importante papel desta modificação pós-tradução in vivo.

Usando modelos de células HeLa, todo o proteoma foi extraído pela primeira vez. Posteriormente, a modelagem com NaHS e ajuste de pH permitiu a marcação precisa de grupos tiol por uma sonda universal de cisteína. Através de uma série de etapas, incluindo enriquecimento, digestão enzimática e detecção por espectrometria de massa, foram identificados 180 peptídeos contendo modificações -SSH, juntamente com 120 proteínas relacionadas, incluindo os sítios de tiolação relatados GAPDH_C152 e C247.