A plataforma tecnológica TurboID envolve a fusão de uma biotina ligase mutada ao terminal C de uma proteína alvo. Em células superexpressas, a adição de biotina biotinila rapidamente as proteínas que interagem em 10 minutos, mesmo à temperatura ambiente, com ruído de fundo mínimo. Esta versatilidade torna o TurboID adequado para uma ampla gama de sistemas biológicos, incluindo células de mamíferos, plantas e insetos. As proteínas marcadas com biotina são então isoladas, enriquecidas e digeridas para produzir amostras de peptídeos para espectrometria de massa, permitindo uma análise detalhada das interações e funções das proteínas.
01.Alta eficiência catalítica
02.Não prejudica as células vivas
03. Alta eficiência e estabilidade de biotinilação
04. Biotinilação eficaz à temperatura ambiente (25°C)
Projeto | Identificação de redes de interação proteína-proteína em células |
Amostra | Lisado celular, células vivas |
Plataforma de Hardware | Pulverizador de células ultrassônicas sem contato, sistema de imagem ChemiDoc MP, espectrômetro de massa Orbitrap Fusion Lumos Tribrid/Orbitrap Exploris 480/Q Exactive HF-X/timsTOF Pro 2 |
Duração do Projeto | 4-6 semanas |
Entregáveis | Relatório do Projeto (incluindo procedimentos experimentais, gráficos de análise de dados, resultados de análises de bioinformática) |
Preço | Clique para consultar |
Objetivo do projeto:Analisar alterações no interactoma proteico da proteína alvo (POI) nas células antes e depois do tratamento medicamentoso.
Solução:Utilize uma estratégia de rotulagem de proximidade construindo um vetor de expressão POI-TurboID, superexpressando-o em células e criando grupos tratados e de controle para biotinilação. Enriquecer o interactoma proteico nas células, seguido de análise qualitativa e quantitativa das diferenças nas proteínas biotiniladas para caracterizar alterações no interactoma POI.
Visualização de dados: