Modificações Pós-Traducionais de Serina e Treonina (PTMs) referem-se às modificações químicas que as proteínas sofrem após a síntese, sendo a fosforilação e a glicosilação as formas mais comuns de modificação. Os PTMs em resíduos de serina e treonina incluem principalmente fosforilação e O-glicosilação. Após a modificação, esses resíduos de aminoácidos podem alterar significativamente a atividade, a estabilidade e as capacidades de interação da proteína, desempenhando assim papéis cruciais na transdução de sinalização celular, na regulação metabólica e em outros processos biológicos importantes. Estudos aprofundados destas modificações ajudam a revelar os mecanismos moleculares por trás das atividades vitais e podem fornecer novos alvos para o tratamento de doenças. Portanto, os PTMs de serina e treonina têm importância indispensável tanto na pesquisa biológica fundamental quanto em aplicações clínicas.
Chomix possui tecnologia avançada de espectrometria de massa capaz de analisar direta e precisamente vários tipos de modificações pós-traducionais de proteínas e seus locais específicos. Ao combinar habilmente técnicas de enriquecimento de separação e rotulagem de isótopos, podem ser alcançadas análises qualitativas e quantitativas em larga escala e de alto rendimento de várias modificações, fornecendo suporte técnico robusto para pesquisas aprofundadas sobre modificações pós-traducionais de proteínas.
A glicosilação ligada a O é um processo bioquímico que transfere cadeias de açúcar para os átomos de oxigênio dos resíduos de serina e treonina nas cadeias peptídicas. Usando reagentes UDP-GalNAz e Y289L GalT1, esses agentes podem marcar moléculas de açúcar em locais de glicosilação com um grupo -N3. As etapas subsequentes envolvendo química de cliques, digestão enzimática, enriquecimento e espectrometria de massa de alta resolução permitem a identificação precisa de locais de O-glicosilação, revelando assim o papel crucial desta modificação pós-tradução nos organismos.
1. Experiência Profissional: Com vasta experiência e publicações em periódicos importantes, oferecemos serviços personalizados para obter os melhores resultados.
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Projeto | Modificações pós-traducionais de serina/treonina baseadas em espectrometria de massa de alta resolução |
Amostra | Lisado, células vivas, amostras de tecidos |
Plataforma de Hardware | VanquishNeo UPLC acoplado ao espectrômetro de massa Orbitrap Exploris 480 (Thermo Fisher Scientific); EASY-nLC1200 UPLC acoplado ao espectrômetro de massa Q Exactive HF-X (Thermo Fisher Scientific) |
Duração do Projeto | 4-8 semanas |
Entregáveis | Relatório do projeto (incluindo imagens de gel, informações do site, etc.) |
Preço | Clique para consultar |
Objetivo do Projeto: O objetivo deste projeto é realizar análises proteômicas químicas aprofundadas da modificação pós-traducional da O-GlcNAcilação usando tecnologia de espectrometria de massa.
Solução: Empregamos uma abordagem combinada de marcação metabólica e espectrometria de massa para realizar análises qualitativas precisas e abrangentes de locais de O-glicosilação. No processo experimental, primeiro determinamos a quantidade da enzima Y289L GalT1 utilizando tecnologia de gel de fluorescência, seguida de análise espectrométrica de massa sob condições experimentais rigorosamente definidas. Através de duas rondas de experiências repetidas, foi identificado um total de 36 locais de glicosilação fiáveis. Um exemplo de espectro MS2 típico é apresentado.