[Совместная статья] | Использование стратегии химической протеомики для раскрытия целевой белковой сети цисплатина и улучшения понимания его противоракового механизма
Благодаря быстрому развитию современной медицины были достигнуты значительные прорывы в исследованиях и разработках лекарств от рака. Среди них цисплатин выделяется своей мощной противоопухолевой эффективностью при лечении различных солидных опухолей, служа маяком надежды для многих больных раком. Несмотря на широкое клиническое применение, понимание внутренних механизмов действия цисплатина остается центральной темой, активно занимаемой научным сообществом. В этом контексте исследовательская группа из Фармацевтического колледжа Тунцзи Университета науки и технологий Хуачжун опубликовала в Журнале неорганической биохимии статью под названием «Молекулярные мишени цисплатина в клетках HeLa, исследованные с помощью стратегии профилирования белков, основанной на конкурентной активности». Импакт-фактор 3.9). Используя технологию конкурентного химического протеомного анализа, основанную на цистеин-специфичных зондах (Competitive ABPP), исследование точно идентифицирует мишени цисплатина и места их действия в клетках HeLa.
Благодаря быстрому развитию современной медицины были достигнуты значительные прорывы в исследованиях и разработках лекарств от рака. Среди них цисплатин выделяется своей мощной противоопухолевой эффективностью при лечении различных солидных опухолей, служа маяком надежды для многих больных раком. Несмотря на широкое клиническое применение, понимание внутренних механизмов действия цисплатина остается центральной темой, активно занимаемой научным сообществом. В этом контексте исследовательская группа из Фармацевтического колледжа Тунцзи Университета науки и технологий Хуачжун опубликовала в Журнале неорганической биохимии статью под названием «Молекулярные мишени цисплатина в клетках HeLa, исследованные с помощью стратегии профилирования белков, основанной на конкурентной активности». Импакт-фактор 3.9). Используя технологию конкурентного химического протеомного анализа, основанную на цистеин-специфичных зондах (Competitive ABPP), исследование точно идентифицирует мишени цисплатина и места их действия в клетках HeLa.
Метод конкурентного профилирования цистеина был использован для идентификации цисплатин-связывающего цистеина в протеомах клеток HeLa с использованием дестиобиотин-йодацетамидного зонда.
В этой статье Chomix предоставил экспертную поддержку в подготовке проб химической протеомики, а также масс-спектрометрической идентификации и анализа в процессе обнаружения цели. Используя оборудование масс-спектрометрии высокого разрешения и технологию химической протеомики, образцы клеток HeLa, обработанные цисплатином, подверглись серии анализов, включая мечение цистеин-реактивным зондом (DBI), разделение белковых осадков, расщепление трипсином, мечение изотопов, обогащение пептидов, меченных зондами, и ЖХ-МС/МС. Этот комплексный подход успешно идентифицировал 3571 пептид, соответствующий 1871 белку, при этом 46 белков были идентифицированы как потенциальные мишени цисплатина. Эти белки-мишени преимущественно связаны с метаболизмом фолиевой кислоты, деубиквитинированием белков, синтезом тетрагидробиоптерина, метаболизмом тетрагидрофолата и другими путями. Профессиональная служба идентификации целей Chomix обеспечивает надежность и точность данных, значительно повышая достоверность и научную ценность результатов исследований.
Рисунок 2: Функциональный анализ целевых белков цисплатина
Помимо подготовки проб для химической протеомики и масс-спектрометрической идентификации, услуги по идентификации мишеней, предоставляемые Chomix, также включают идентификацию сайтов связывания лекарственного средства с белком, что имеет решающее значение для выявления механизма действия лекарств. Для дальнейшей проверки эффекта связывания между цисплатином и его недавно обнаруженными белками-мишенями для проверки был выбран высокодостоверный CAPN 1. Белок инкубировали с цисплатином в молярном соотношении 1:10, и в дополнение к исходному массовому пику белка наблюдали новый пик продукта, причем разница масс соответствовала разнице масс 10 молекул цисплатина. Этот результат ясно демонстрирует взаимодействие между CAPN 1 и цисплатином. Предыдущие исследования показали, что индуцированный цисплатином апоптоз в клетках HeLa ингибируется, что указывает на положительную корреляцию между белком и противоопухолевой активностью цисплатина. Это исследование дает новую информацию для дальнейшего изучения механизма действия и токсичности цисплатина.
Рисунок 3: До и после реакции между белком CAPN 1 и цисплатином.
Таким образом, эта статья успешно раскрывает цели цисплатина в клетках HeLa с использованием метода конкурентного ABPP, идентифицируя новую мишень CAPN 1. Это открытие дает решающее понимание механизмов, лежащих в основе действия и токсичности цисплатина. Это исследование не только обогащает наше понимание механизма действия цисплатина, но также предоставляет мощный инструмент для будущих исследований в этой области.