Получите бесплатные образцы сегодня.
Продукты
Магнитные шарики ChomiX®-Magbeads, устойчивые к протеазе и стрептавидину (prSA)
Кот.Нет.:CMXR-000002
наименование товара: Магнитные шарики ChomiX®-Magbeads, устойчивые к протеазе и стрептавидину (prSA).
Внедрение продукции
Магнитные шарики ChomiX®-Magbeads, покрытые стрептавидином, устойчивым к протеазе (prSA), состоят из химически модифицированного стрептавидина, в котором остатки лизина и аргинина химически изолированы.Эта модификация не влияет на связывание гранул с биотинилированными белками, предотвращая при этом ферментативную деградацию протеазами трипсина и LysC.В протеомных исследованиях на основе масс-спектрометрии для переваривания белков часто используются протеазы трипсина и LysC.Чтобы избежать потери образца, исследователи непосредственно выполняют ферментативное расщепление на гранулах в системах с магнитными шариками стрептавидина, загруженными биотинилированными белками.
Однако этот процесс ферментативного расщепления также генерирует большое количество пептидов, производных стрептавидина, которые серьезно мешают обнаружению пептидов с низким содержанием пептидов при последующем масс-спектрометрическом анализе.
Таким образом, разработка магнитных шариков ChomiX®-Magbeads, покрытых стрептавидином (prSA), устойчивых к протеазе, может значительно уменьшить это вмешательство, что очень подходит для прямого ферментативного расщепления биотинилированных белков, нанесенных на магнитные шарики, и может широко использоваться в химической протеомике и эксперименты по межбелковому взаимодействию в клетках, таких как APEX и BioID.
Гранулы имеют концентрацию 10 мг/мл и размер частиц 1,0 мкм, высокую емкость загрузки стрептавидина (приблизительно 50 мкг/1 мг) и чрезвычайно высокую гидрофильность.Их суперпарамагнитные свойства гарантируют быстрый магнитный отклик.Они также обладают превосходной редисперсионной и магнитной стабильностью, эффективно обеспечивая высокую скорость связывания с белками, низкую неспецифическую адсорбцию, однородность реакции и постоянство обнаружения.
Литературный кейс
Магнитные шарики используются для обогащения и извлечения биотинилированных белков из протеома с последующим прямым расщеплением на шариках и идентификацией с помощью масс-спектрометрии высокого разрешения.По сравнению с обычными гранулами стрептавидина (wtS), образцы устойчивых к протеазам гранул стрептавидина (prS) демонстрируют едва обнаруживаемое количество пептидов, полученных из стрептавидина, в образцах (рис. 1).
При применении в экспериментах BioID для идентификации белков, взаимодействующих с SEC61B, в клетках HeLa prS может идентифицировать 362 белка, при этом общая интенсивность сигнала белка примерно в 10 раз выше, чем у wtS (рис. 2).Данные взяты из литературы (Molecular Systems Biology, 2020).
Рисунок 1: Хроматограммы базовых пиков пептидов в образцах после обогащения wtS (слева) или prS (справа).
Соответствующие интенсивности трех репрезентативных пептидов (m/z = 603,3655,31018,0), полученных из расщепленного на гранулах стрептавидина, показаны на нижней панели (XIC).
Рисунок 2: Количество и интенсивность белков, взаимодействующих с SEC61B, идентифицированных с помощью обычного стрептавидина wtS и prS.
Примечание
1. Перед первым использованием тщательно перемешайте и хорошо перемешайте, чтобы предотвратить изменение концентрации магнитных шариков.Избегайте длительного воздействия ультразвука, чтобы не повредить поверхность магнитных шариков.
2. Раствор для хранения гранул содержит низкие концентрации низкомолекулярных противомикробных препаратов. Перед использованием выполните магнитную сепарацию и промывание 2-3 раза чистой водой или буферным раствором.Используйте бусины как можно скорее, чтобы избежать длительного хранения.
3. Храните при температуре 4 ℃ и избегайте замораживания-оттаивания во время использования.
Хотите получить бесплатные образцы магнитных бусин?
Напишите свое сообщение здесь и отправьте его нам