Identifiering av protein-proteininteraktion i levande celler: närhetsmärkning

Teknisk plattform

TurboID-teknologiplattformen involverar fusion av ett muterat biotinligas till C-terminalen av ett målprotein. I överuttryckta celler biotinylerar tillsatsen av biotin snabbt interagerande proteiner inom 10 minuter, även vid rumstemperatur, med minimalt bakgrundsljud. Denna mångsidighet gör TurboID lämplig för ett brett utbud av biologiska system, inklusive däggdjursceller, växter och insekter. Biotinmärkta proteiner isoleras sedan, berikas och smälts för att producera peptidprover för masspektrometri, vilket möjliggör detaljerad analys av proteininteraktioner och funktioner.

Våra fördelar

01.Hög katalytisk effektivitet

02. Skadar inte levande celler

03.Hög biotinyleringseffektivitet och stabilitet

04. Effektiv biotinylering vid rumstemperatur (25°C)

Vår tjänst

Projekt	Identifiering av protein-proteininteraktionsnätverk i celler
Prov	Cellysat, levande celler
Hårdvaruplattform	Beröringsfri ultraljudscellpulveriserare，ChemiDoc MP Imaging System，Orbitrap Fusion Lumos Tribrid/Orbitrap Exploris 480/Q Exactive HF-X/timsTOF Pro 2 masspektrometer
Projektets varaktighet	4-6 veckor
Leveranser	Projektrapport (inklusive experimentella procedurer, dataanalysdiagram, bioinformatikanalysresultat)
Pris	Klicka för att konsultera

Fallstudie

Projektmål:Analysera förändringar i proteininteraktomen för målproteinet (POI) i celler före och efter läkemedelsbehandling.
Lösning:Använd en strategi för närhetsmärkning genom att konstruera en POI-TurboID-expressionsvektor, överuttrycka den i celler och sätta upp läkemedelsbehandlade grupper och kontrollgrupper för biotinylering. Berika proteininteraktomen i celler, följt av kvalitativ och kvantitativ analys av skillnader i biotinylerade proteiner för att karakterisera förändringar i POI-interaktomen.
Datavisualisering: