TurboID-teknologiplattformen involverar fusion av ett muterat biotinligas till C-terminalen av ett målprotein. I överuttryckta celler biotinylerar tillsatsen av biotin snabbt interagerande proteiner inom 10 minuter, även vid rumstemperatur, med minimalt bakgrundsljud. Denna mångsidighet gör TurboID lämplig för ett brett utbud av biologiska system, inklusive däggdjursceller, växter och insekter. Biotinmärkta proteiner isoleras sedan, berikas och smälts för att producera peptidprover för masspektrometri, vilket möjliggör detaljerad analys av proteininteraktioner och funktioner.
01.Hög katalytisk effektivitet
02. Skadar inte levande celler
03.Hög biotinyleringseffektivitet och stabilitet
04. Effektiv biotinylering vid rumstemperatur (25°C)
Projekt | Identifiering av protein-proteininteraktionsnätverk i celler |
Prov | Cellysat, levande celler |
Hårdvaruplattform | Beröringsfri ultraljudscellpulveriserare,ChemiDoc MP Imaging System,Orbitrap Fusion Lumos Tribrid/Orbitrap Exploris 480/Q Exactive HF-X/timsTOF Pro 2 masspektrometer |
Projektets varaktighet | 4-6 veckor |
Leveranser | Projektrapport (inklusive experimentella procedurer, dataanalysdiagram, bioinformatikanalysresultat) |
Pris | Klicka för att konsultera |
Projektmål:Analysera förändringar i proteininteraktomen för målproteinet (POI) i celler före och efter läkemedelsbehandling.
Lösning:Använd en strategi för närhetsmärkning genom att konstruera en POI-TurboID-expressionsvektor, överuttrycka den i celler och sätta upp läkemedelsbehandlade grupper och kontrollgrupper för biotinylering. Berika proteininteraktomen i celler, följt av kvalitativ och kvantitativ analys av skillnader i biotinylerade proteiner för att karakterisera förändringar i POI-interaktomen.
Datavisualisering: