[Yuqori ballli muvaffaqiyat] Yangi AJ 2-30 inhibitori bilan SLC15A4 ning yallig'lanishga qarshi regulyatsiyasini yaxshilash: Kimyoviy proteomika yondashuvi (IF 14.8)
Ushbu maqola antigen taqdim qiluvchi hujayralarda yuqori darajada ifodalangan muhim yallig'lanishli transmembran oqsili bo'lgan SLC15A4 ga qaratilgan bir qator yangi inhibitorlarni ishlab chiqish va skrining qilish uchun kimyoviy proteomikadan foydalanadi. Potentsial ingibitorlarni dastlabki maqsadli yo'naltirishda to'liq funksionallashtirilgan fragment (FFF) zond kutubxonasi strategiyasidan foydalanildi, bu FFF-21 ni ko'plab zondlar orasida IFN-a ishlab chiqarishning kuchli inhibitori sifatida aniqladi. Keyinchalik tuzilmaviy optimallashtirish AJ 2-30 birikmasini ishlab chiqishga olib keldi, bu nafaqat ajoyib inhibisyonni namoyish etdi, balki SLC15A4 ni asosiy maqsadli post-krosslinking modifikatsiyasi sifatida tasdiqladi. Keyingi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, AJ 2-30 SLC15A4 barqarorligini pasaytirib, uning lizosomal yo'l orqali degradatsiyasini keltirib chiqaradigan va TLR 7-9 va NOD faollashuvini samarali ravishda inhibe qilish orqali kuchli yallig'lanishga qarshi ta'sir ko'rsatadi. Ushbu tadqiqot nafaqat sezilarli yallig'lanishga qarshi faollikka ega bo'lgan SLC15A4 ingibitorlarini muvaffaqiyatli kashshof qilibgina qolmay, balki yangi yallig'lanishga qarshi dori vositalarini ishlab chiqish uchun ham yo'l ochadi.
Tadqiqot yo'nalishi
Eksperimental jarayon
1. SLC15A4 ingibitorlarini skrining qilish uchun to'liq funktsional fragment (FFF) prob kutubxonasi strategiyasi.
Mualliflar o'z tadqiqotini SLC15A4 ingibitorlarini to'liq ishlab chiqilgan fragment (FFF) zond kutubxonasi yordamida skrining qilish orqali boshladilar. Ushbu FFF ikkita komponentni o'z ichiga oladi: SLC15A4 ni nishonga olish uchun mo'ljallangan planshet bo'laklarini o'z ichiga olgan molekulyar tanib olish guruhi va SLC15A4 ni vizualizatsiya qilish uchun qo'sh akrimidin va alkin guruhlarini o'z ichiga olgan boshqa foto-o'zaro bog'langan boyitilgan guruh. Kimyoviy proteomikaning ish oqimidan foydalangan holda, mualliflar ushbu FFF zond kutubxonasining hujayralardagi SLC15A4 bilan bog'lanishini tasdiqladilar va FFF probi TLR 9-stimulyatsiya qilingan hujayralardagi IFN-a darajasini pasaytirishi mumkinligini baholadilar. Natijalar shuni ko'rsatdiki, SLC15A4 ga bog'langan barcha FFF problari orasida FFF-21 IFN-a darajasini inhibe qilishning eng yuqori qobiliyatini namoyish etdi, uning yorliqsiz analogi FFF-21c ham shunga o'xshash inhibitiv ta'sir ko'rsatadi.
2. SLC15A4 ingibitorlarining fotokross-bog'lanish modifikatsiyasi.
FFF-21c birikmasini dastlabki tanlashdan so'ng, mualliflar uning tuzilishini optimallashtirishga kirishdilar. FFF-21c ning bir nechta analoglarini sintez qilish orqali ular AJ 2-30 ni eng kuchli inhibitor sifatida aniqladilar. Fotokrosslinking usullaridan foydalangan holda, ular uning nishon bilan o'zaro ta'sirini tasdiqladilar. Keyinchalik, to'g'ridan-to'g'ri yorliqlash usulidan va ABPPning bilvosita raqobat usulidan, shuningdek uyali termal siljish tahlili (CETSA) yordamida mualliflar SLC15A4 ni AJ 2-30 ning asosiy maqsadi sifatida aniq belgilab oldilar.
3. Yallig'lanishga qarshi mexanizm AJ 2-30 SLC15A4 barqarorligini buzganligini ko'rsatadi.
AJ 2-30 ning SLC15A4 bilan bog'lanishi va uning inhibitiv ta'siri tasdiqlanganidan so'ng, mualliflar AJ 2-30 ning yallig'lanishga qarshi mexanizmini tushuntirish uchun bir qator biokimyoviy tajribalar o'tkazdilar. Natijalar shuni ko'rsatdiki, AJ 2-30 proteinni beqarorlashtirish orqali SLC15A4 ning lizosoma vositachiligida degradatsiyasini keltirib chiqaradi va shu bilan SLC15A4 ga bog'liq ravishda immun hujayralarida TLR 7-9 va NOD faollashishini inhibe qiladi. Bu yallig'lanish va otoimmün kasalliklarni davolashda AJ 2-30 potentsialini ta'kidlaydi.
Xulosa qilib aytganda, ushbu tadqiqot ajoyib yallig'lanishga qarshi faollikka ega kuchli SLC15A4 inhibitori AJ 2-30 ni aniqlash uchun kimyoviy proteomika usullaridan mohirlik bilan foydalanadi. Ushbu birikma SLC15A4 barqarorligini va uning antigen namoyishi va yallig'lanish signalizatsiya yo'llaridagi rolini aniq maqsad qilib olgan holda hayvonlar modellarida sezilarli samaradorlikni namoyish etadi. Ushbu muhim taraqqiyot nafaqat yallig'lanishga qarshi terapevtik maqsadlarni tushunishimizni kuchaytiradi, balki turli xil yallig'lanish va otoimmün kasalliklar uchun yangi terapevtik vositalarni kelajakda rivojlantirish uchun mustahkam poydevor yaratadi. Keyingi tadqiqotlar va klinik tekshiruvlar bilan ushbu yangi SLC15A4 inhibitörleri ko'plab bemorlar uchun yanada aniq va samarali davolash usullarini taklif qilishga tayyor bo'lib, shu bilan global sog'likka chuqur ta'sir ko'rsatadi.