[Hamkorlikdagi maqola] | Sisplatinning maqsadli oqsil tarmog'ini ochish va uning saratonga qarshi mexanizmini tushunishni kuchaytirish uchun kimyoviy proteomika strategiyasidan foydalanish
Zamonaviy tibbiyotning jadal rivojlanishi bilan saraton dori-darmonlarini tadqiq qilish va ishlab chiqishda sezilarli yutuqlarga erishildi. Bular orasida sisplatin turli xil qattiq o'smalarni davolashda kuchli o'simtaga qarshi samaradorligi bilan ajralib turadi va ko'plab saraton bemorlari uchun umid chirog'i bo'lib xizmat qiladi. Klinikada keng qo'llanilishiga qaramay, sisplatin ta'sirining ichki mexanizmlarini tushunish ilmiy hamjamiyat tomonidan faol ravishda olib boriladigan markaziy mavzu bo'lib qolmoqda. Shu nuqtai nazardan, Huazhong Fan va Texnologiya Universitetining Tongji farmatsevtika kolleji tadqiqot guruhi Noorganik biokimyo jurnalida ("Raqobatbardosh faoliyatga asoslangan protein profilini yaratish strategiyasi orqali o'rganilgan HeLa hujayralaridagi sisplatinning molekulyar maqsadlari" nomli maqolani chop etdi. Ta'sir faktori 3.9). Sisteinga xos zondlarga (Raqobatbardosh ABPP) asoslangan raqobatbardosh kimyoviy proteomik tahlil texnologiyasidan foydalangan holda, tadqiqot HeLa hujayralarida sisplatin maqsadlari va ularning ta'sir qilish joylarini aniq aniqlaydi.
Zamonaviy tibbiyotning jadal rivojlanishi bilan saraton dori-darmonlarini tadqiq qilish va ishlab chiqishda sezilarli yutuqlarga erishildi. Bular orasida sisplatin turli xil qattiq o'smalarni davolashda kuchli o'simtaga qarshi samaradorligi bilan ajralib turadi va ko'plab saraton bemorlari uchun umid chirog'i bo'lib xizmat qiladi. Klinikada keng qo'llanilishiga qaramay, sisplatin ta'sirining ichki mexanizmlarini tushunish ilmiy hamjamiyat tomonidan faol ravishda olib boriladigan markaziy mavzu bo'lib qolmoqda. Shu nuqtai nazardan, Huazhong Fan va Texnologiya Universitetining Tongji farmatsevtika kolleji tadqiqot guruhi Noorganik biokimyo jurnalida ("Raqobatbardosh faoliyatga asoslangan protein profilini yaratish strategiyasi orqali o'rganilgan HeLa hujayralaridagi sisplatinning molekulyar maqsadlari" nomli maqolani chop etdi. Ta'sir faktori 3.9). Sisteinga xos zondlarga (Raqobatbardosh ABPP) asoslangan raqobatbardosh kimyoviy proteomik tahlil texnologiyasidan foydalangan holda, tadqiqot HeLa hujayralarida sisplatin maqsadlari va ularning ta'sir qilish joylarini aniq aniqlaydi.
Destiobiotin yodoasetamid probi yordamida HeLa hujayra proteomalarida sisplatinni bog'laydigan sisteinni aniqlash uchun raqobatbardosh sistein profilini aniqlash usuli qo'llanildi.
Ushbu maqolada Chomix maqsadni aniqlash jarayonida kimyoviy proteomika namunalarini tayyorlash va massa spektrometriyasini aniqlash va tahlil qilish bo'yicha ekspert yordamini taqdim etdi. Yuqori aniqlikdagi mass-spektrometriya uskunalari va kimyoviy proteomika texnologiyasidan foydalangan holda, sisplatin bilan ishlov berilgan HeLa hujayra namunalari sistein-reaktiv zond (DBI) yorlig'i, oqsillarni cho'ktirishni ajratish, tripsin hazm qilish, izotop yorlig'i, zond etiketli petoptilarni boyitish, jumladan, bir qator tahlillardan o'tdi. va LC-MS/MS. Ushbu keng qamrovli yondashuv 1871 oqsilga mos keladigan 3571 peptidni muvaffaqiyatli aniqladi, 46 ta oqsil sisplatinning potentsial maqsadlari sifatida aniqlandi. Ushbu maqsadli oqsillar asosan folat metabolizmi, oqsillarni deubiquitination, tetrahidrobiopterin sintezi, tetrahidrofolat metabolizmi va boshqa yo'llar bilan bog'liq. Chomixning professional maqsadli identifikatsiya xizmati ma'lumotlarning ishonchliligi va aniqligini ta'minlaydi, tadqiqot natijalarining ishonchliligi va ilmiy qiymatini sezilarli darajada oshiradi.
Shakl 2: Sisplatin maqsadli oqsillarining funktsional tahlili
Kimyoviy proteomika namunalarini tayyorlash va massa spektrometriyasini identifikatsiya qilishdan tashqari, Chomix tomonidan taqdim etiladigan maqsadli identifikatsiya xizmatlari, shuningdek, dorilarning ta'sir qilish mexanizmini aniqlash uchun juda muhim bo'lgan dori-oqsilni bog'lash joylarini aniqlashni o'z ichiga oladi. Sisplatin va uning yangi kashf etilgan oqsil maqsadlari o'rtasidagi bog'lanish ta'sirini yanada tasdiqlash uchun tasdiqlash uchun yuqori ishonchli CAPN 1 tanlangan. Protein 1:10 molyar nisbatda sisplatin bilan inkubatsiya qilindi va oqsilning asl massa cho'qqisiga qo'shimcha ravishda yangi mahsulot cho'qqisi kuzatildi, massa farqi 10 ta sisplatin molekulasining massa farqiga to'g'ri keladi. Ushbu natija CAPN 1 va sisplatin o'rtasidagi o'zaro ta'sirni aniq ko'rsatadi. Oldingi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, HeLa hujayralarida sisplatin tomonidan qo'zg'atilgan apoptoz inhibe qilinadi, bu protein va sisplatinning o'smaga qarshi faolligi o'rtasidagi ijobiy bog'liqlikni ko'rsatadi. Ushbu tadqiqot sisplatinning ta'sir qilish mexanizmi va toksikligini yanada o'rganish uchun yangi tushunchalar beradi.
3-rasm: CAPN 1 oqsili va sisplatin o'rtasidagi reaktsiyadan oldin va keyin.
Xulosa qilib aytganda, ushbu maqola HeLa hujayralarida sisplatin maqsadlarini raqobatbardosh ABPP usuli yordamida muvaffaqiyatli yoritib beradi, yangi maqsad CAPN 1ni aniqlaydi. Bu kashfiyot sisplatinning ta'siri va toksikligi asosida yotgan mexanizmlar haqida muhim tushunchalarni beradi. Ushbu tadqiqot nafaqat sisplatinning ta'sir qilish mexanizmi haqidagi tushunchamizni boyitadi, balki ushbu sohadagi kelajakdagi tadqiqotlar uchun kuchli vositani ham taqdim etadi.