head_banner1

Mahsulotlar

ChomiX®-Magbeads Proteazga chidamli Streptavidin (prSA) bilan qoplangan magnit boncuklar

Mushuk.Yo'q.: CMXR-000002

Mahsulot nomi:ChomiX®-Magbeads proteazga chidamli Streptavidin (prSA) bilan qoplangan magnit boncuklar

Mahsulot taqdimoti

ChomiX®-Magbeads Proteazga chidamli Streptavidin (prSA) bilan qoplangan magnit boncuklar kimyoviy jihatdan o'zgartirilgan streptavidin bilan ishlab chiqilgan, bu erda lizin va arginin qoldiqlari kimyoviy muhrlangan.Ushbu modifikatsiya biotinlangan oqsillarni bog'laydigan boncuklarga ta'sir qilmaydi va Tripsin va LysC proteazlari tomonidan fermentativ degradatsiyani oldini oladi.Mass-spektrometriyaga asoslangan proteomik tadqiqotlarda tripsin va LysC proteazlari ko'pincha oqsillarni hazm qilish uchun ishlatiladi.Namuna yo'qolishining oldini olish uchun tadqiqotchilar biotinlangan oqsillar bilan to'ldirilgan streptavidin magnit boncuk tizimlarida to'g'ridan-to'g'ri enzimatik hazm qilishni amalga oshiradilar.

Biroq, bu fermentativ hazm qilish jarayoni, shuningdek, streptavidindan kelib chiqadigan ko'p miqdorda peptidlarni hosil qiladi, bu esa keyingi massa spektrometriyasi tahlilida kam miqdorda peptidlarni aniqlashga jiddiy xalaqit beradi.

Shu sababli, ChomiX®-Magbeads Proteazga chidamli Streptavidin (prSA) bilan qoplangan magnit boncuklar ishlab chiqilishi bu shovqinni sezilarli darajada kamaytirishi mumkin, bu magnit boncuklarga yuklangan biotinlangan oqsillarni to'g'ridan-to'g'ri fermentativ hazm qilish uchun juda mos keladi va kimyoviy proteomikada keng qo'llanilishi mumkin. APEX va BioID kabi hujayralardagi oqsil-oqsil o'zaro ta'siri tajribalari.

Boncuklar konsentratsiyasi 10 mg/ml va zarrachalar hajmi 1,0 mkm, yuqori streptavidin yuklash qobiliyatiga (taxminan 50 mkg / 1 mg) va juda yuqori gidrofillikka ega.Ularning superparamagnit xususiyatlari tezkor magnit javobni kafolatlaydi.Ular, shuningdek, mukammal qayta tarqalish barqarorligi va magnit barqarorlikka ega bo'lib, yuqori oqsillarni bog'lash tezligini, past o'ziga xos bo'lmagan adsorbsiyani, reaktsiyaning bir xilligini va aniqlashning mustahkamligini samarali ta'minlaydi.

Adabiyot ishi

Magnit boncuklar proteomadan biotinlangan oqsillarni boyitish va ajratib olish uchun ishlatiladi, so'ngra to'g'ridan-to'g'ri boncuk ustida hazm qilish va yuqori aniqlikdagi massa spektrometriyasi bilan identifikatsiya qilish.An'anaviy streptavidin boncuklari (wtS) bilan solishtirganda, proteazga chidamli streptavidin boncuklari (prS) namunalari namunalarda streptavidindan olingan peptidlarning deyarli aniqlanmaydigan miqdorini ko'rsatadi (1-rasm).

HeLa hujayralarida SEC61B o'zaro ta'sir qiluvchi oqsillarni aniqlash uchun BioID tajribalarida qo'llanilganda, prS 362 ta oqsilni aniqlay oladi, umumiy protein signali intensivligi wtS dan taxminan 10 baravar yuqori (2-rasm).Ma'lumotlar adabiyotlardan olingan (Molekulyar tizimlar biologiyasi, 2020).

_cgi-bin_mmwebwx-bin_webwxgetmsgimg__&MsgID=5975855783773314984&skey=@crypt_f8f7338c_c7041bda8f36ff4ded0d27c585996b1f&mmweper_

1-rasm: wtS (chapda) yoki prS (o'ngda) boyitilgandan so'ng namunalardagi peptidlarning asosiy tepalik xromatogrammalari.

Boncuklarda hazm qilingan streptavidindan hosil bo'lgan uchta vakili peptidning (m / z = 603,3,655,3,1018,0) mos keladigan intensivligi pastki panelda (XIC) ko'rsatilgan.

_cgi-bin_mmwebwx-bin_webwxgetmsgimg__&MsgID=7303143611616562577&skey=@crypt_f8f7338c_c7041bda8f36ff4ded0d27c585996b1f&mmweper_

Shakl 2: An'anaviy streptavidin wtS va prS tomonidan aniqlangan SEC61B o'zaro ta'sir qiluvchi oqsillarning soni va intensivligi.

Eslatma

1. Birinchi foydalanishdan oldin magnit boncuk konsentratsiyasini o'zgartirmaslik uchun to'liq vorteks va yaxshilab aralashtiriladi.Magnit boncuklar yuzasiga zarar yetkazmaslik uchun uzoq muddatli ultratovushdan saqlaning.
 
2. Boncuk saqlash eritmasi kichik molekulali mikroblarga qarshi past konsentratsiyani o'z ichiga oladi, Ishlatishdan oldin magnit ajratish va toza suv yoki tampon eritmasi bilan 2-3 marta yuvishni amalga oshiring.Uzoq vaqt saqlanmaslik uchun boncuklardan imkon qadar tezroq foydalaning.
 
3. 4℃ haroratda saqlang va foydalanish paytida muzlashdan saqlaning.

Magnit boncuklar namunalarini bepul olishga qiziqasizmi?

Bepul namunalaringizni bugun oling.


  • Oldingi:
  • Keyingisi:

  • Xabaringizni shu yerga yozing va bizga yuboring