TurboID texnologiya platformasi mutatsiyaga uchragan biotin ligazani maqsadli oqsilning C-terminusiga birlashtirishni o'z ichiga oladi. Haddan tashqari ifodalangan hujayralarda biotin qo'shilishi 10 daqiqa ichida, hatto xona haroratida ham minimal fon shovqini bilan o'zaro ta'sir qiluvchi oqsillarni biotinillaydi. Ushbu ko'p qirralilik TurboIDni sutemizuvchilar hujayralari, o'simliklar va hasharotlar kabi biologik tizimlarning keng doirasi uchun mos qiladi. Biotin bilan belgilangan oqsillar massa spektrometriyasi uchun peptid namunalarini ishlab chiqarish uchun ajratiladi, boyitiladi va hazm qilinadi, bu esa oqsillarning o'zaro ta'siri va funktsiyalarini batafsil tahlil qilish imkonini beradi.
01.Yuqori katalitik samaradorlik
02.Tirik hujayralarga zarar yetkazmaydi
03.Yuqori biotinilatsiya samaradorligi va barqarorligi
04. Xona haroratida samarali biotinilatsiya (25°C)
Loyiha | Hujayralarda oqsil-oqsil o'zaro ta'sir tarmoqlarini aniqlash |
Namuna | Hujayra lizati, tirik hujayralar |
Uskuna platformasi | Kontaktsiz ultratovushli hujayra pulverizatori,ChemiDoc MP tasvirlash tizimi,Orbitrap Fusion Lumos Tribrid/Orbitrap Exploris 480/Q Exactive HF-X/timsTOF Pro 2 massa spektrometri |
Loyiha muddati | 4-6 hafta |
Etkazib beriladigan narsalar | Loyiha hisoboti (shu jumladan eksperimental protseduralar, ma'lumotlarni tahlil qilish jadvallari, bioinformatika tahlili natijalari) |
Narxi | Maslahat olish uchun bosing |
Loyiha maqsadi:Dori bilan davolashdan oldin va keyin hujayralardagi maqsadli oqsilning (POI) oqsil interaktomidagi o'zgarishlarni tahlil qiling.
Yechim:POI-TurboID ifoda vektorini yaratish, uni hujayralarda haddan tashqari ifodalash va biotinilatsiya uchun dori-darmon bilan ishlov berilgan va nazorat guruhlarini o'rnatish orqali yaqinlik belgilarini belgilash strategiyasidan foydalaning. POI interaktomidagi o'zgarishlarni tavsiflash uchun hujayralardagi oqsil interaktomini boyiting, so'ngra biotinlangan oqsillardagi farqlarni sifat va miqdoriy tahlil qiling.
Ma'lumotlarni vizualizatsiya qilish: