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ChomiX®-Magbeads 疊氮化物塗層磁珠是透過將疊氮化物生物正交基團共價連接到磁珠表面而設計的。分別透過不可裂解的連接基(圖A)和可裂解的連接基團(圖B),這些珠子可用於富集炔烴修飾的大分子,包括蛋白質、核酸、抗體和糖。超過 斯特依黴親和素 (SA)c塗過的m磁性的b埃德斯,ChomiX®-Magbeads 疊氮化物包被磁珠有以下優點:
1.透過高效的「點擊化學」反應,炔烴修飾的大分子可以直接共價結合到磁珠上,這與鏈黴親和素和生物素之間的非共價和可逆相互作用不同。因此,該產品具有較高的回收率和較好的重複性。
2. 由於磁珠表面沒有蛋白質,因此不會引入酵素消化引起的背景勝肽污染。此外,這些珠子減少了非特異性吸附,使樣品更清潔,有助於提高低豐度蛋白質的識別效率。
3.化學分子修飾磁珠性質穩定,更容易運輸與保存。
4. 可裂解的疊氮化物磁珠能夠使化學探針修飾的勝肽溫和釋放(使用甲酸),有利於後續的質譜鑑定。
5.產品性價比高,避免了鏈黴親和素-生物素富集時間,並提高了實驗效率。
圖 A:疊氮化物包覆的磁珠,不可裂解的連接基團
圖形B: A子德包被磁珠, 可裂解基團
因此,ChomiX®-Magbeads疊氮基磁珠的開發可以大幅提高生物正交標記的炔烴修飾大分子的富集和分離效率,從而簡化實驗流程。特別是,引入可切割的連接基團,可以有效釋放目標蛋白質或勝肽,有利於蛋白質定量或化學探針修飾位點的鑑定。相關研究發表在蛋白質體學領域權威期刊Journal of Proteome Research (J Proteome Res. 2023,3360-3367)。此珠子的濃度為10 mg/ml,粒徑為1.0 μm,具有高疊氮負載能力(30-50nmol/1mg)和優異的親水性。此外,它們還具有超順磁性,可確保快速的磁響應。其優異的再分散穩定性和磁穩定性有效保證了高蛋白質結合率、低非特異性吸附、反應均勻性和檢測一致性。
2023年,ChomiX首席科學家、北京大學王楚教授團隊在Journal of Proteome Research上發表了高效簡潔的化學蛋白質體學實驗方案。此方案使用可裂解疊氮化物磁珠,顯著縮短化學探針標記的半胱氨酸勝肽基團的分析時間(圖1)。另外,從圖2可以明顯看出,修飾勝肽的鑑定率有了很大的提高。與傳統的鏈黴親和素磁珠相比,疊氮化物磁珠在成本、時間和效率方面表現出優越的性能,已成為蛋白質研究,特別是化學蛋白質體學的有力工具。
圖1:與可裂解基團的疊氮化物包被磁珠結合,superTOP-ABPP實驗時間可縮短至9小時
圖2:與具有可裂解基團的疊氮化物包被的磁珠結合使用,在相同條件下可鑑定超過10,000個半胱胺酸勝肽
1.首次使用前,充分渦旋混合,防止改變磁珠濃度。避免長時間超音波,以免損壞磁珠表面。
2. 珠子儲存液含有20%乙醇。使用前進行磁分離,並以純水或緩衝液洗滌2-3次。盡快使用珠子,避免長時間存放;
3.4℃保存,使用過程中避免凍融。
4. 可切割 疊氮化物磁珠應該be 遠離儲存和使用過程中酸性物質。
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