TurboID 技術平台涉及將突變的生物素連接酶融合到目標蛋白的 C 端。在過度表現的細胞中,即使在室溫下,添加生物素也會在 10 分鐘內快速生物素化相互作用的蛋白質,且背景噪音極小。這種多功能性使 TurboID 適用於廣泛的生物系統,包括哺乳動物細胞、植物和昆蟲。然後,生物素標記的蛋白質被分離、富集和消化,產生用於質譜分析的勝肽樣品,從而能夠詳細分析蛋白質相互作用和功能。
01.催化效率高
02.不傷害活細胞
03.生物素化效率高、穩定性高
04.室溫(25°C)下有效的生物素化
專案 | 細胞中蛋白質-蛋白質交互作用網絡的鑑定 |
樣本 | 細胞裂解液、活細胞 |
硬體平台 | 非接觸式超音波細胞粉碎機,ChemiDoc MP 影像系統,Orbitrap Fusion Lumos Tribrid/Orbitrap Exploris 480/Q Exactive HF-X/timsTOF Pro 2 質譜儀 |
專案持續時間 | 4-6週 |
可交付成果 | 專案報告(包括實驗流程、數據分析圖表、生物資訊分析結果) |
價格 | 點擊諮詢 |
專案目標:分析藥物治療前後細胞中標靶蛋白(POI)的蛋白質交互作用組的變化。
解決方案:利用鄰近標記策略,建構 POI-TurboID 表達載體,在細胞中過度表達,並設定藥物處理組和對照組進行生物素化。富集細胞中的蛋白質相互作用組,然後對生物素化蛋白質的差異進行定性和定量分析,以表徵 POI 相互作用組的變化。
數據視覺化: