絲胺酸和蘇胺酸翻譯後修飾 (PTM) 是指蛋白質合成後發生的化學修飾,其中磷酸化和糖基化是最常見的修飾形式。絲胺酸和蘇胺酸殘基上的翻譯後修飾主要包括磷酸化和O-糖基化。經過修飾後,這些胺基酸殘基可以顯著改變蛋白質的活性、穩定性和相互作用能力,從而在細胞訊號傳導、代謝調節和其他關鍵生物過程中發揮至關重要的作用。對這些修飾的深入研究有助於揭示生命活動背後的分子機制,並可能為疾病治療提供新的標靶。因此,絲胺酸和蘇胺酸PTM在基礎生物學研究和臨床應用中都具有不可或缺的重要性。
Chomix擁有先進的質譜技術,能夠直接且精確地分析各類蛋白質翻譯後修飾及其特定位點。透過分離富集技術和同位素標記的巧妙結合,可以實現大規模、高通量的各種修飾的定性和定量分析,為蛋白質翻譯後修飾的深入研究提供強有力的技術支撐。
O-連接糖基化是將糖鏈轉移到肽鏈中絲氨酸和蘇氨酸殘基的氧原子上的生化過程。使用 UDP-GalNAz 和 Y289L GalT1 試劑,這些試劑可以用 -N3 基團在糖基化位點上標記糖分子。涉及點擊化學、酶消化、富集和高分辨率質譜的後續步驟可以精確識別 O-糖基化位點,從而揭示這種翻譯後修飾在生物體中的關鍵作用。
1. 專業知識:憑藉豐富的經驗和在領先期刊上發表的論文,我們提供量身定制的服務以獲得最佳結果。
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4. 先進設備:配備 Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480 和 Bruker timsTOF 等尖端質譜儀,支援突破性研究。
專案 | 基於高分辨率質譜的絲氨酸/蘇氨酸翻譯後修飾 |
樣本 | 裂解物、活細胞、組織樣本 |
硬體平台 | VanquishNeo UPLC 與 Orbitrap Exploris 480 質譜儀 (Thermo Fisher Scientific) 併用; EASY-nLC1200 UPLC 與 Q Exactive HF-X 質譜儀 (Thermo Fisher Scientific) 併用 |
專案持續時間 | 4-8週 |
可交付成果 | 項目報告(包括凝膠圖像、場地資訊等) |
價格 | 點擊諮詢 |
計畫目標:本計畫的目的是利用質譜技術對O-GlcNAcylation翻譯後修飾進行深入的化學蛋白質體學分析。
解:我們採用代謝標記和質譜結合的方法對 O-糖基化位點進行精確、全面的定性分析。在實驗過程中,我們首先使用螢光凝膠技術測定Y289L GalT1酶的量,然後在嚴格規定的實驗條件下進行質譜分析。透過兩輪重複實驗,共鑑定出36個可靠的糖基化位點。給出了典型 MS2 譜圖的範例。