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ChomiX®-Magbeads 叠氮化物涂层磁珠是通过将叠氮化物生物正交基团共价连接到磁珠表面而设计的。分别通过不可裂解的连接基团(图A)和可裂解的连接基团(图B),这些珠子可用于富集炔烃修饰的大分子,包括蛋白质、核酸、抗体和糖。超过 斯特依霉亲和素 (SA)c涂过的m磁性的b埃德斯,ChomiX®-Magbeads 叠氮化物包被磁珠具有以下优点:
1.通过高效的“点击化学”反应,炔烃修饰的大分子可以直接共价结合到磁珠上,这与链霉亲和素和生物素之间的非共价和可逆相互作用不同。因此,该产品具有较高的回收率和较好的重复性。
2. 由于磁珠表面没有蛋白质,因此不会引入酶消化引起的背景肽污染。此外,这些珠子减少了非特异性吸附,使样品更清洁,有助于提高低丰度蛋白质的识别效率。
3、化学分子修饰磁珠性质稳定,更易于运输和保存。
4. 可裂解的叠氮化物磁珠能够使化学探针修饰的肽温和释放(使用甲酸),有利于后续的质谱鉴定。
5、产品性价比高,避免了链霉亲和素-生物素富集时间,提高了实验效率。
图 A:叠氮化物包被的磁珠,不可裂解的连接基团
图形B: A子德包被磁珠, 可裂解基团
因此,ChomiX®-Magbeads叠氮基磁珠的开发可以大大提高生物正交标记的炔烃修饰大分子的富集和分离效率,从而简化实验流程。特别是,引入可切割的连接基团,可以有效地释放目标蛋白质或肽,有利于蛋白质定量或化学探针修饰位点的鉴定。相关研究发表在蛋白质组学领域权威期刊Journal of Proteome Research (J Proteome Res. 2023,3360-3367)上。该珠子的浓度为10 mg/ml,粒径为1.0 μm,具有高叠氮负载能力(30-50nmol/1mg)和优异的亲水性。此外,它们还具有超顺磁性,可确保快速的磁响应。其优异的再分散稳定性和磁稳定性有效保证了高蛋白结合率、低非特异性吸附、反应均匀性和检测一致性。
2023年,ChomiX首席科学家、北京大学王楚教授团队在Journal of Proteome Research上发表了高效简洁的化学蛋白质组学实验方案。该方案使用可裂解叠氮化物磁珠,显着缩短化学探针标记的半胱氨酸肽基团的分析时间(图1)。另外,从图2可以明显看出,修饰肽的鉴定率有了很大的提高。与传统的链霉亲和素磁珠相比,叠氮化物磁珠在成本、时间和效率方面表现出优越的性能,已成为蛋白质研究,特别是化学蛋白质组学的有力工具。
图1:与可裂解基团的叠氮化物包被磁珠相结合,superTOP-ABPP实验时间可缩短至9小时
图2:与具有可裂解基团的叠氮化物包被的磁珠结合使用,在相同条件下可以鉴定超过10,000个半胱氨酸肽
1、首次使用前,充分涡旋混匀,防止改变磁珠浓度。避免长时间超声,以免损坏磁珠表面。
2. 珠子储存液含有20%乙醇。使用前进行磁分离,并用纯水或缓冲液洗涤2-3次。尽快使用珠子,避免长时间存放;
3、4℃保存,使用过程中避免冻融。
4. 可切割 叠氮化物磁珠应该be 远离储存和使用过程中酸性物质。
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