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产品

ChomiX®-Magbeads 抗蛋白酶链霉亲和素 (prSA) 包被磁珠

猫。不。:CMXR-000002

产品名称:ChomiX®-Magbeads 抗蛋白酶链霉亲和素 (prSA) 包被磁珠

产品介绍

ChomiX®-Magbeads 抗蛋白酶链霉亲和素 (prSA) 包被磁珠采用化学修饰的链霉亲和素设计,其中赖氨酸和精氨酸残基被化学密封。这种修饰不会影响珠子与生物素化蛋白质的结合,同时防止胰蛋白酶和 LysC 蛋白酶的酶促降解。在基于质谱的蛋白质组学研究中,胰蛋白酶和 LysC 蛋白酶经常用于蛋白质消化。为了避免样品损失,研究人员直接在负载有生物素化蛋白质的链霉亲和素磁珠系统中进行珠上酶消化。

然而,这种酶消化过程也会产生大量的链霉亲和素衍生肽,严重干扰后续质谱分析中低丰度肽的检测。

因此,开发ChomiX®-Magbeads抗蛋白酶链霉亲和素(prSA)包被磁珠可以大大减少这种干扰,非常适合磁珠负载的生物素化蛋白质的直接酶消化,可广泛应用于化学蛋白质组学和APEX 和 BioID 等细胞中的蛋白质-蛋白质相互作用实验。

该珠子浓度为10 mg/ml,粒径为1.0 μm,具有较高的链霉亲和素负载量(约50 μg/1mg)和极高的亲水性。它们的超顺磁特性保证了快速的磁响应。它们还具有优异的再分散稳定性和磁稳定性,有效保证高蛋白结合率、低非特异性吸附、反应均匀性和检测一致性。

文献案例

磁珠用于从蛋白质组中富集和提取生物素化蛋白质,然后通过高分辨率质谱进行直接磁珠消化和鉴定。与传统的链霉亲和素珠 (wtS) 相比,蛋白酶抗性链霉亲和素珠 (prS) 样品显示样品中几乎检测不到含量的链霉亲和素衍生肽(图 1)。

当应用于 BioID 实验中识别 HeLa 细胞中的 SEC61B 相互作用蛋白时,prS 可以识别 362 种蛋白,总体蛋白信号强度比 wtS 高约 10 倍(图 2)。数据来源于文献(分子系统生物学,2020)。

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图 1:富集 wtS(左)或 prS(右)后样品中肽的基峰色谱图。

下图 (XIC) 显示了由珠上消化的链霉亲和素生成的三种代表性肽 (m / z = 603.3,655.3,1018.0) 的相应强度。

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图 2:通过常规链霉亲和素 wtS 和 prS 鉴定的 SEC61B 相互作用蛋白的数量和强度。

笔记

1、首次使用前,充分涡旋混匀,防止改变磁珠浓度。避免长时间超声,以免损坏磁珠表面。
 
2. 微珠储存液中含有低浓度小分子抗菌剂,使用前应进行磁分离,并用纯水或缓冲液洗涤2-3次。尽快使用珠子以避免长时间存放。
 
3、4℃保存,使用过程中避免冻融。

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