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TurboID 技术平台涉及将突变的生物素连接酶融合到目标蛋白的 C 末端。在过度表达的细胞中，即使在室温下，添加生物素也会在 10 分钟内快速生物素化相互作用的蛋白质，且背景噪音极小。这种多功能性使 TurboID 适用于广泛的生物系统，包括哺乳动物细胞、植物和昆虫。然后，生物素标记的蛋白质被分离、富集和消化，产生用于质谱分析的肽样品，从而能够详细分析蛋白质相互作用和功能。

项目目标：分析药物治疗前后细胞中靶蛋白（POI）的蛋白质相互作用组的变化。
解决方案：利用邻近标记策略，构建 POI-TurboID 表达载体，在细胞中过度表达，并设置药物处理组和对照组进行生物素化。富集细胞中的蛋白质相互作用组，然后对生物素化蛋白质的差异进行定性和定量分析，以表征 POI 相互作用组的变化。
数据可视化：